gianni48 1,473 Posted April 30, 2016 Occupandomi di innesti su peperoncini, sentivo il bisogno di sapere qualcosa di più sull'istologia del loro fusto, soprattutto per vedere dove si trova il cambio nei diversi stadi di crescita. In internet non ho trovato nulla e allora mi è venuta l'idea di utilizzare la fotocamera per l'osservazione di sezioni sottili. Non ho usato coloranti e penso che non ne userò in futuro. Ho ricavato una sezione sottile dal quarto internodo sopra ai cotiledoni di un fusto di Capsicum annuum non ancora biforcato e l'ho posta sul vetro di un faretto a led con luce bianca fredda; fotografandola, ho ottenuto questo risultato: ... prima osservazione: la sezione è pentagonale Ho ingrandito il preparato... ... e, anche se non è colorato la struttura mi sembra abbastanza evidente. Ho ruotato l'immagine, ritagliando il fascio fibrovascolare in alto a destra che mi sembra il più integro e ho elaborato l'immagine per indicare i vari tessuti: Ho fotografato anche altre sezioni sottili sopra e sotto questa, e ho notato alcune cose interessanti: Questa è una sezione che ho fatto a livello del primo internodo sopra i cotiledoni; è stata la prima osservazione che ho fatto, ponendo la sezione in una goccia d'acqua, ma poi ho visto che è molto meglio fotografare il preparato a secco. Si può osservare che la sezione è quadrangolare e che xilema e floema si sono espansi e il cambio è ben visibile fra loro. La prossima è una sezione ricavata su un internodo vicino all'apice vegetativo sembra che il cambio, oltre a trovarsi fra floema e xilema, circondi all'esterno il floema stesso... ma qui ci vorrebbe una colorazione selettiva per il cambio. Questi sono solo i primi tentativi e penso che si possa fare di meglio (anche se non molto). Sicuramente cambierò la sorgente luminosa che è troppo intensa e temo possa danneggiare il sensore della fotocamera. 7 Share this post Link to post Share on other sites
joefish 4,856 Posted May 1, 2016 Molto interessante, e complimenti per le bellissime foto. Come hai fatto le sezioni? Strumenti particolari/specifici o a mano? Sei, cmq, al livello di foto fatte al microscopio! Per migliorare ancora potresti usare un vetro smerigliato che diffonda la luce della sorgente. Share this post Link to post Share on other sites
gianni48 1,473 Posted May 1, 2016 Ho fatto le sezioni a mano libera, usando una mezza lametta Gillette, che è quella che ha il taglio migliore. Ovviamente la lamella dovrebbe essere nuova o quasi, la mia l'avevo usata poco prima per fare questo innesto: https://www.youtube.com/watch?v=pNqWajCEeIk e, notando che già ad occhio nudo si notavano dei puntini sul fusto (che sono i fasci fibrovascolari) ho voluto provare a vedere se fotografando una sezione sottile per trasparenza ed ingrandendo l'immagine si notava anche il cambio... ed è stato così. Per tagliare la sezione ho usato il metodo indicato nel seguente disegno: Come si prepara un blocchetto “fissaoggetti” in midollo di sambuco; in A per il caso di oggetti laminari; in B il blocchetto preparato per un oggetto cilindrico; in D il blocchetto montato. Con le seguenti varianti: 1) non ho usato il midollo di sambuco (introvabile) ma polistirolo a bassa densità. 2) non ho legato il blocchetto; basta la pressione delle dita. 3) nel disegno vedo una parte del preparato che sporge... non si fa così!... si taglia il preparato assieme al polistirolo. se la sezione non riesce completa (come quella dell'ultima foto), può essere utile ugualmente purchè si veda quello che si vuole osservare (anzi, a volte queste sezioni imperfette, essendo più sottili danno immagini migliori del tessuti) La qualità delle immagini ottenute fotografando con un microscopio professionale sezioni tagliate con un microtomo professionale e poi colorate con coloranti specifici per i vari tessuti è senza dubbio molto superiore rispetto a quelle ottenute da me, però nessuna delle immagini pubblicate in internet (almeno fra quelle che ho visto io) riguarda le solanacee. Riguardo alla illuminazione sono d'accordo e ho costruito un attrezzo nel quale la luce è data da una lampadina da 5 W, con vetro bianco latte. Share this post Link to post Share on other sites
gianni48 1,473 Posted May 1, 2016 Ecco alcuni link con siti dove sono pubblicate immagini di istologia vegetalei: http://www.dipbot.unict.it/frame/botgenit.htmhttp://www.bioveg.unito.it/atlante/http://www.atlantebotanica.unito.it/page.asp?. Share this post Link to post Share on other sites
gianni48 1,473 Posted May 2, 2016 Ecco come eseguo una sezione sottile: https://www.youtube.com/watch?v=BjOa0X8u-do L'internodo è il primo sopra i cotiledoni; è piuttosto lignificato e questo rende più difficoltoso fare una sezione sottile. Il risultato è questo: Il cambio è quella sottile striscia chiara fra xilema e floema che formano due anelli. 2 Share this post Link to post Share on other sites
gianni48 1,473 Posted May 3, 2016 Sezione fatta nell’internodo vicino alla punta di Capsicum annuum Sezione fatta sulla parte di fusto sotto ai cotiledoni di Capsicum annuum Sezione di fusto di Solanum chrysotrichum Sezione di picciolo fogliare di Solanum chrysotrichum Sezione di fusto di Solanum torvum 1 Share this post Link to post Share on other sites
Gabri R.S. 9 Posted May 4, 2016 Un post veramente spettacolare! Complimenti! . Share this post Link to post Share on other sites
gianni48 1,473 Posted May 4, 2016 Un post veramente spettacolare! Complimenti! . Grazie! Le immagini che si ottengono in questo modo sono piuttosto interessanti e, anche se dal punto di vista scientifico non dicono molto, possono essere utili a chi, come me, si diletta a fare innesti su solanacee, visto che sulla rete non ho trovato niente su queste piante. Share this post Link to post Share on other sites